Moyens pour reconnaitre des mutations

[Emma01]

Bonjour à tous ! J'ai besoin de vous pour quelques précisions, concernant les notions suivantes :

- Dans la technique O.L.A : je n'ai pas bien compris le rôle et surtout le mécanisme du P.E.O.

- Je ne comprend pas non plus le système HRM.

- Je ne comprends pas le rôle des microsatellites lorqu'on doit faire le diagnostic d'une maladie mais qu'on ne connait pas le gène responsable.
Et puis, quel est le rôle exact d'une région polymorphe, d'un polymorphisme ? Peut-il être à l'origine de mutations et donc de maladie et comment ?

Merci d'avance ! ^^.

[Emma01]

Personne ? 

[Fafa]

Salut!
Pour les HMR, voici ce que j'ai trouvé: "après PCR en présence d’un intercalant fluorescent cette technique permet, en appliquant une
montée en T° très progressive, de discriminer des variants. La dénaturation provoque la baisse de la fluorescence puis son extinction quand la dénaturation est complète. Chaque séquence a donc une courbe de fusion qui lui est propre. Une modification de cette courbe signale la présence d’une anomalie."

Pour le reste, je te renvoie sur ces deux liens:
http://www.google.fr/url?sa=t&source=web&cd=3&ved=0CC0QFjAC&url=http%3A%2F%2Ffacmed.univ-rennes1.fr%2Fwkf%2Fstock%2FRENNES20110316052704cbouvierDiagGenotypiqueDCEM1.ppt&rct=j&q=technique%20OLA%20pEO&ei=cjuKTf3kMNCw4AbjopHlDg&usg=AFQjCNFsFyNLZswNy6W5jQeiNVD6ScDlMA&cad=rja (dont est extraite l'explication pour l' HMR)
http://www.edu.upmc.fr/sdv/masselot_05001/polymorphisme/polymorphisme.html

Voilà! Bon courage!

[Toguy]

Concernant les micro satellites
Dans certains cas, ils peuvent permettre (ou en tout cas participe) au diagnostic de maladie génétique.
Pour ne citer qu'un exemple
Dans le Syndrome de Lynch ou Cancer Colorectal Héréditaire / HNPCC : Hereditary NonPolyposis Colorectal Cancer
Ce cancer est lié à une
Mutation d’un gène MMR (mécanisme de réparation des mésappariement de l'ADN) [je résume]
Conséquence, plus de mécanisme de réparation des mésappariement
=> ACCUMULATION DE DEFAUTS
Particulièrement dans des séquences répétées
(lié la polymérase qui dérape sur les séquences répétés au cours des réplications)

Ce qui explique pourquoi dans certaines zone de la l'ADN, on retrouve des micro satellites anormaux
C.A.D des répétitions trop longues de GCGCGCGCGCGCG au lieu de GCGCG normal.
Chez ces patients, porteur de ce type de micro satellite on parle alors de phénotype RER + (réplication Error postive)
Qui apporte un argument en faveur du cancer colorectal héréditaire.

Voilà un exemple concret, j'espère que j'ai été à peu près clair ^^